用于培养植物特别是组织培养植物前体的方法及其容器pdfbob.com
bob.com一种在培养基上培育组织培养愈伤组织的方法,包括制备半固态培养基平板并将基置于蜂窝状成型板的上面,该成型板限定出许多中空通道。将大量的愈伤组织分配到平板上,使每个愈伤组织有序地位于每个通道中。在常规条件下,培育愈伤组织使其自由生长。向平板施加气压使平板穿经成型板的壁而被切割成小方块,每个平板小方块带有一个植物bob.com,然后再从成型板的底面排出平板小块,以进行后续的移植。
1: 一种培育植物,特别是在营养基质,如琼脂培养基上培育组织培养愈伤组织的方法,包括如下步骤: 制备半固态的营养基质平板; 将所述的平板放在蜂窝样成形板上,该成形板由其薄壁围绕形成多个中空的通道; 将多个所述的愈伤组织分布到所述的平板上,使每个愈伤组织置于每个成排的通道内; 在常规条件下使所述的愈伤组织理想地生长; 向所述的平板上施加气压,使其被推压并由所述的薄壁切割成单个的平板块,每一平板块均截有一植物;以及 从成形板的底面排出所述的平板块。
2: 如权利要求1所述的方法,其中所述的平板被放入一平底锅样盘子的模子里,而所述成形板的顶面有一部分被包埋在所述的平板内。
4: 如权利要求3所述的方法,其中成形板包括倾斜聚集的顶端和底端环状框壁,和介于其中的环绕物。
6: 如权利要求1所述的方法,其中所述的愈伤组织分布到所述平板上包括如下步骤: 制备含有所述悬浮的愈伤组织的液态基质; 提供具有凹陷基质的筛板,每个基质经脱落孔向外扩展,其排列使得根据粘在筛板上的排列位置相对于成形板的通道; 使筛板经过液态悬浮液bob.com,使愈伤组织被捕获在每个所述的凹陷中,以及 将许多愈伤组织置于所述平板的顶端表面上,而不必改变它们的相对位置。
7: 如权利要求6所述的方法,其中所述的筛板具有固定装置以适合同成形板的环状框壁相互配合。
8: 如权利要求7所述的方法,其中所述的固定装置包括许多突出于所述筛板的栓。
10: 如权利要求6所述的方法,其中所述的将愈伤组织置于平板上包括将平板置于筛板上以及将平板和筛板翻转过来的步骤。
11: 如权利要求1所述的方法,其中经过向通道中施加压力使所述的平板块从每个通道中排出。
12: 如权利要求11所述的方法,其中所述的平板块被排入移种盘的各个分隔间中。
13: 一种培育植物的容器,特别是培育在营养基质如琼脂中生长的组织培养愈伤组织的容器,它包括: 底盘; 成形板,它包括一蜂窝样结构经过其薄壁的环绕确定多个中空通道,并具有一环状顶端和底端框壁,所述的底端框壁紧紧地固定在所述的底盘中; 置于所述成型板上面的半固态营养基质平板; 以及 固定在成形板环状框壁上面的透明盖。
14: 如权利要求13所述的容器,其中成形板顶部被部分地包埋在所述平板内bob.com。
16: 如权利要求15所述的容器,其中所述的成形板包含一向外突出的环绕物,它在所述的环状顶端和底端框架之间扩展。
17: 如权利要求13所述的容器,其中所述通道的壁向其顶部的方向倾斜集聚。
18: 一种在权利要求6所述的方法中使用的筛板,包括凹陷形基质,每个基质经脱落孔扩展,当筛板同成形板扣合时该凹陷的位置恰好排列在成形板上所述的每个通道的中央轴。
20: 如权利要求19的筛板,它进一步包括用于在成形板口定位所述筛板的装置。
21: 如权利要求20的筛板、其中所述的定位装置包括突出于含有所述凹陷形基质的筛板面的栓。
本发明涉及植物培育,特别是涉及在组织培养细胞,或愈伤组织(Callus以下简称愈伤组织)的基础上培育植物,这种细胞能在一种通称为琼脂的营养基质上生长。
在琼脂培养基上的植物前体或母体(precursor)逐渐地生长,这是一种最常用的植物培育方法,这主要是由于采用这种方法能大大地提高产量(每单位面积的植物)。当然,这是同在土壤中种子培育方法对照而言。
然而,在试验室条件下,这种细胞培养愈伤组织通常在试管,试瓶或者类似的容器内进行,因而有许多不尽人意之处:假如植物被周围各种隔断物的限制会妨碍它自身的生长(在各个方向妨碍其自由生长;隔断物的阴影效应等);需要使用机械方法(用摄子及其类似物)来获取植物以进一步培养该植物,通常还要在秧苗盘或称移植盘中再种植,请记住,植物在其早期阶段非常脆弱,因此从一个环境将其移植到另一个环境时,很可能会被损伤,所以,操作时需格外小心。
为了克服这一难题,人们提出各种方法bob.com,如US4,620,390为本申请人采用的方法之一。
本发明的目的在于提供一种植物培育方法,一方面,保证植物愈伤组织能自由地、无限制的四处生长,另一方面,又快速、方便,植物易位时,损伤最小。
本发明的另一目的在于提供一种处理植物的方法,该方法不用人类接触却十分有效,并且很容易自动化操作。
为了完成本发明的目的,本发明涉及一种培育植物地方法,特别是在诸如琼脂类营养基质上培育组织培养愈伤组织的方法,该方法包括制备一种半固态营养基质的平板,将平板放置在一蜂窝状的成形板上,由成形板的薄壁限定成许多中空通道,将大量的愈伤组织分布在所述的平板上,从而使每个愈伤组织成排地置于每个通道内,在常规条件下使所述的愈伤组织理想的生长,向所述的平板施加气压使其穿过所述的薄壁并分割成许多各自的平板小块,每个平板小块携带一个植物,从成形板的底面取出这些小块。
按本发明的另一方面,本发明还提供一种培育植物,特别是培育诸如琼脂营养基质上生长的组织培养愈伤组织中使用的容器,该容器包括一底盘;一成形板,该成形板包含一以其薄壁限定出许多中空通道的蜂窝样结构,同时成形板还具有一环状的顶端和底端框架壁,其底端框壁刚好能紧紧地固定于所述的底盘;一位于所述的成形板上面的含有营养基质的半固态平板;以及一透明的盖盘,其恰好可固定在成形板的环状壁上。
以下将结合附图和实施例详细描述本发明的实施方案,以更清楚地理解本发明的优点及特征。
图3为本发明之容器的局剖图,其中可见用部分成形板制备营养基质平板的步骤;
图9,可见容器的右侧显示被移种后的活愈伤组织,在其左侧显示植物的最后培养阶段。
图11为喷射获取在相应的平板生长块上的每个植物的方式,以进行后续的加工。
如图1所示,可见本发明方法中使用的容器,它包括一平底锅样的底盘10,一蜂窝样,或网状的成形板12以及一透明盖子14。底盘10为直角形,但可以按需要制成其它的形状。底盘10具有一底板16,同时还有4个壁18a,18b,18c和18d,该四个壁向外倾斜同成形板12的壁相互扣合,以下还将对此进行描述。
成形板12也为直角的,与底盘10的尺寸相对应,它包括一多孔结构,或者网状结构,从平面横截面上看为多个通道20。然而,各种其他横截面的形状也可以使用。通道20被成形板薄壁的格板分成此形状,而优选地是由底向顶壁逐渐成斜形或锥形,在其顶端的截止处几乎成刀刃状的唇20′。所述的成形板由4个向下聚集斜向环状底部框壁22a至22d,和4个向上聚集环状框壁24a至24d,以及一个环状物26围绕。该环绕物26可以是连续的,或者含有各种形状的部件。框壁22紧紧地贴合固定在底盘10的敞开的顶端中。最后,盖子24扣合固定在壁24上。此盖子必需是透明的,并具有足够的高度以适应现有技术中熟知的组织培养愈伤组织的生长。
参见附图3,它示出制备为培育活的材料愈伤组织而采用的营养基质平板的方法步骤。已知,用水溶液和添加物包括矿物质和其他供植物需要的营养组份来制备营养基质或者琼脂培养基,这种培养基质用模具制成适当形状使其在室温下同化,形成一果胨状的物质。
根据本发明一个特别特征,琼脂果胨状平板30是在一个模具盘32中制成的,模具盘32固定在成形板12的顶端框壁24上面。因此,将液态的琼脂填入模具盘32中,成形板12置于其上,结果是,其顶端,即通道20的刀刃状唇20′被部分地浸没,从而在琼脂固化后,所述的唇20′被包埋在平板材料中。然而,如下文所述,这种成形板12和平板30之间的关系仅仅供选择之用,本发明之方法可以按实践去操作而不必拘泥于这一特征。
平板30固化后,去掉模具盘32,把由成形板12连同相关的平板30和底盘10组成的盘具翻转过来放置,如图4所示。
参见图5,6和7,可见一筛板40,它是为在预先设定的平板30上分配单个活的细胞体而特别设计的,这一设计使得每个细胞体准确地放置在每个通道20的中央。
因此,筛板40包括(图7中清楚可见的),具有小凹陷的基质42,它经从十字形的脱落孔44向外扩展。另外筛板还具有一持握部分46,八个固定栓48,每一对固定栓从筛板40的4个角处由小凹陷侧向外突出,这种设计安排使得当把筛板40放在成形板12上面时,所有的小凹陷42会按并排地对准每个通道20的中央轴,同时,在平板30的上面留有一定的距离S,如图8所示。
将每个活的植物愈伤组织放入小凹陷42处的方法如附图6所示,可按下述方式进行。准备一个装有液体52的容器50,这个液体52中悬浮分布着活的植物愈伤组织。将筛板40放入所述的液体52中,向上移动筛板,如箭头56所示,愈伤组织54就会单个被抓住,使其落入小凹陷42当中(见附图7)。
载有愈伤组织54的筛板40必须立即放在平板30上,(但有些小凹陷42可能是空的)。正是为了这个目的,将底盘10和成形板12的套具翻转置于筛板40的上面(未示出),然后,一道翻过来成为图8中所示的位置。去掉筛板40使愈伤组织留在平板30上,如图9所示。
进一步采用适当的工具(未示出)用手工操作使愈伤组织54粘住,并部分进入平板30的材料内可能是很必要的。
将透明盖子14盖住成形板12,使得植物向上生长一合适的大小56(约10mm),如附图9的左侧所示。
为了将植物56移出容器进行移种,通常移入常规的种植盘内,实施如附图10a和10b中所示的方法。在成形板12移出底盘10后,将成形板12置于一底座60上。底座60的顶面最好制成粗糙状以便可以通气(见下文)。另外一个带有气压配件64的盖盘62被紧紧地扣在成形板12的上部框壁24的上面,最好再加一个带枢轴的钓件66固定。
经过向盖62内施加足够的气压,平板30的作用像个“塞子”并整体向下推移,使得经过每个通道20的边缘20′逐渐地将其切割。因此,所述的平板被切成许多小方块70,每个小方块则在成形板12的底侧落在底盘60上,当然它含有植物56(见图10b)。
在这个操作系统中,现在准备进行最后一个步骤,将小方块70吐出每个通道20的底部开口。这一操作可再用一个或多个喷嘴72固定在通道20的顶端加压,使小方块排出。
可以十分清楚的得知,对植物56可进一步加工处理,可通过自动的机械设备(未示出),直接将每个方块70植入常规移植盘74的各自分隔间中,该移植盘可按如图11所示的X-Y方向移动。
可见采用相对简单的设备,本发明提供一种有益的方法,它可确保方便bob.com、快捷、有效地培育植物的活组织生长,一方面,保证对那种非常脆弱的植物在其生长末期最小地损伤,而另一方面,很容易地将其自身提供给以后的加工处理。
当然本领域的普通技术人员可以在不超过本申请专利要求保护的范围内对本发明进行各种修改,改变和变动。
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一种在培养基上培育组织培养愈伤组织的方法,包括制备半固态培养基平板并将基置于蜂窝状成型板的上面,该成型板限定出许多中空通道。将大量的愈伤组织分配到平板上,使每个愈伤组织有序地位于每个通道中。在常规条件下,培育愈伤组织使其自由生长。向平板施加气压使平板穿经成型板的壁而被切割成小方块,每个平板小方块带有一个植物,然后再从成型板的底面排出平板小块,以进行后续的移植。 。