植物组织培养无病毒苗木培育pptbob.com

　　bob.com第十二章无病毒苗木培育;本章内容提要： 植物病毒危害与研究历史概况 脱毒培养的概念与意义 脱除病毒的原理与方法 脱病毒植株的检测与保存;一、植物病毒的危害与研究概况;2、植物病毒的危害 2.1 植物病毒的种类 已报道的植物病毒达500多种，且危害越来越严重。 核果类： 148 余种； 马铃薯： 30 余种； 苹 果： 30 余种； 柑 桔： 20 多种； 观赏植物：200 多种。 19世纪欧洲马铃薯晚疫病；1998年6月马铃薯病 毒在欧洲蔓延。 草莓??毒；柑橘衰退病；柑橘黄龙病。;TMV;2.2 病毒对植物外观状态的影响;黄瓜花叶病毒（CMV）;芋的花叶病;变色型：叶片的局部或全部颜色改变。如褪绿、变黄、变橙、变红、变紫、变蓝绿等。郁金香碎裂病毒感染郁金香，使其花色由单色发生斑驳或纵向条点。 坏死与变质：某些细胞组织死亡或组织质地变软或变硬或木栓化。;芋的枯萎病;2.3 染病后对生长和经济性状的影响 影响植物的正常生理代谢，不利于生长发育，出现各种病症，bob.com如花叶，黄化。 因植物病毒导致的年均损失约600亿美元，仅次于线年，印尼有人发现，患枯萎病的甘蔗放在50-520C的热水中保持30分钟，可去除枯萎病。 1936年，Kunkel报道患有桃黄萎病(yellow virus)的植株，在34-360C处理14天可失活。 1952年，法国morel通过培养茎尖培养获得第一株脱毒苗，1955年，获得马铃薯脱毒苗。 目前，很多农作物都已经获得了脱毒苗。;4 离体培养脱毒的概念与意义 4.1 概念： 是指通过植物组织培养技术，在离体的条件下，进行脱毒培养，从而获得无病毒再生植株的技术。 ;4.2 意义 现在离体培育无病毒苗(virus-free plant)已在生产中发挥重要作用。 可提高植物的生理状态，从而有效防病。 可对已退化了的优良品性作物进行复壮，从而提高产量和品质。 大蒜经组培脱毒后，蒜头可增产23.3%～114.3%，bob.com蒜薹增产58.3%～175.0%。 用脱毒草莓苗进行生产，可提高果实产量20% ~ 45%，果实可溶性固形物含量增加5.3%～15.3%。;二、植物脱毒原理与方法 1 原理： 病毒在植物体内的分布是不均匀的，在茎尖中呈梯度分布。在受侵染的植株中，顶端分生组织无病毒或含毒量极低。（具体见P 182 页） 组织的含毒量随与茎尖的距离加大而增加。bob.com 植物病毒自身不具有主动转移的能力。 植物细胞的分裂与病毒繁殖之间存在竞争。bob.com 适当高温可以钝化病毒活性（不能杀死病毒）;1、物理的方法 热处理（热疗）法：温汤浸渍法(木本)、热空气处理法(草本)。 原理：适当高温处理可钝化病毒。病毒衣壳蛋白分子结构不同，抗热能力不同。利用不同病毒受热力处理后衣壳蛋白变性，病毒活性丧失的原理进行热处理脱毒。此时病毒不能合成或合成很少，而破坏却增加，使寄主体内病毒含量不断降低。把握处理的部位、温度范围、时间。 应用：蔓性长春花、苹果、树莓、草莓、菊花、黄瓜、梨、康乃馨等已有报道或应用。;2、化学方法 采用某些化学物质，如生长调节剂、2-硫尿嘧啶，抗病毒制剂—virazole等。;3、生物学方法;植物组织培养无病毒苗木培育;食用百合的脱毒培养过程;3.2 愈伤组织培养脱毒法 愈伤组织中某些细胞不带病毒，可能是细胞的分裂速度快于病毒的复制速度，而似的少数细胞无病毒，这样通过这些细胞来再生植株，以获得无病毒苗。;3.3 珠心胚培养脱毒 利用多胚性植物(如柑桔和芒果)的珠心胚培养脱除病毒，获得无病毒苗。因为珠心细胞与维管束系统无直接联系。 缺点：20-30%的变异率、童期较长。 3.4 花器官等培养脱毒 如草莓花药、bob.com香蕉花序轴、水仙的子房切片。已在马铃薯、大蒜、草莓、水仙、香蕉等园艺植物中脱毒成功。;植物组织培养无病毒苗木培育;3.5 微体嫁接离体培养脱毒法 （见书本188页） 方法： 技术关键：;3.6 综合脱毒法 1） 茎尖培养结合热处理 2） 茎尖培养结合病毒钝化剂处理;热处理结合茎尖脱毒培养 ;四 脱毒苗的鉴定;(2) 免疫法 A、酶联免疫吸附法 (Enzyme Linked Immunosorbent Assay，ELISA) 1997年Clark和Adams用微量血凝板建立了诊断植物病毒的ELISA技术。Casper首先用其测定了PLRV病毒。 原理：抗血清(antiserum)鉴定法： 抗血清即含有抗体的血清；血清反应即抗体与抗原的结合。由于血清反应的特异性，故可用于病毒的鉴定。 特点：特异性高；测定速度快；灵敏度高；可定量。;植物组织培养无病毒苗木培育;植物组织培养无病毒苗木培育;植物组织培养无病毒苗木培育;B：生物素—亲和素—酶联免疫吸附法； C：免疫吸附电子显微术； D：点免疫结合试验。 3、PCR方法：近年来发展起来的广泛用于各种病原菌检测的方法。 4、电子显微镜(Electron microscope):检查法 直接观察，但病毒浓度不能太低。可得知病毒颗粒的大小，形状和结构，对病毒鉴定很重要。;作业与探究 1、什么是植物无病毒培养？ 2、植物无病毒培养的方法有哪些，试用列表的形式加以比较。 ？植物毒素与植物脱毒有什么不同？;植物组织培养无病毒苗木培育

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